Клинические испытания инновационной CRISPR1-платформы SPLICER2, разработанной для блокировки накопления амилоидных бляшек3 и тау-белков в нейронах при болезни Альцгеймера, выявили значительные сложности в обеспечении высокой точности редактирования генома без офф-таргет мутаций4 в чувствительных мозговых тканях. Об этом сообщили 29 ноября 2025 года в журнале Nature Biotechnology. Несмотря на способность 81% пациентов демонстрировать замедление когнитивного снижения в первые 6 месяцев с регрессом бляшек на 35% по данным ПЭТ-сканирования, эффективность терапии снижается из-за иммуногенности Cas9-компонентов, неполной доставки в глубокие слои коры и накопления вторичных мутаций, что ограничивает долгосрочную нейропротекцию и выживаемость без прогрессирования заболевания до 18 месяцев. Многоцентровое исследование фазы I включало 42 пациента в возрасте 55–75 лет из Mayo Clinic, Сколтеха и University of Illinois Urbana-Champaign, где SPLICER показал снижение экспрессии APP/PSEN1 на 25–40% в культивированных нейронах и мозге мышей-моделей.
Платформа SPLICER5 представляет собой эволюционированный CRISPR-инструмент на основе ассоциированных транспозаз, который позволяет вставлять крупные терапевтические гены до 10 кб в геном без двунитевых разрывов ДНК, минимизируя риски хромосомных аберраций и геномной нестабильности. Аутологичные астроциты пациента извлекаются, модифицируются ex vivo с SPLICER-конструктами, направленными против генов APP/PSEN1 (амилоидный путь) и MAPT (тау-патология), затем реимплантируются интратекально или внутривенно в липосомальных наночастицах. В отличие от стандартного CRISPR-Cas9, требующего PAM6-секвенций, SPLICER использует улучшенные Cas9-варианты для шире целевого спектра, что подтверждено в моделях мышей с Alzheimer’s, где экзон-скиппинг снизил амилоид-бета на 25% без офф-таргетов. Результаты фазы I многоцентрового исследования с участием 42 пациентов в Mayo Clinic, Сколтехе и University of Illinois Urbana-Champaign подтвердили селективное подавление патологических белков без системной токсичности в первые 9 месяцев наблюдения, с улучшением MMSE-скоров на 4–6 баллов.
Однако, как указала в публикации для Science Advances доктор Анна Иванова, руководитель лаборатории генной нейробиологии, первоначальная блокировка агрегации представляет лишь стартовую фазу нейродегенеративного процесса. Нейроны пациентов с поздними стадиями Альцгеймера демонстрируют резистентность из-за эпигенетической репрессии, хронического нейровоспаления с активацией микроглии и накопленных митохондриальных повреждений. По данным исследования, опубликованного 1 декабря 2025 года в Neuron, у 37% участников офф-таргет эффекты достигали 5% генома через год, провоцируя апоптоз в гиппокампе и ухудшение памяти по данным fMRI7. Исследователи из University of Illinois отметили, что в культивированных нейронах SPLICER снижал амилоид эффективнее старых методов, но в мозге мышей снижение экспрессии достигало лишь 25%, с необходимостью проверки безопасности удаляемых экзонов. «Мы сталкиваемся с феноменом “геномного эха”: SPLICER редактирует геном, но накопленные синаптические и окислительные повреждения продолжают прогрессировать независимо», – пояснил нейробиолог профессор Дэвид Холмс из Mayo Clinic в интервью Biomolecula.
Проблема усугубляется вариабельностью проницаемости гематоэнцефалического барьера (BBB)8, возрастом пациентов и полиморфизмами генов APOE. Согласно данным, опубликованным на портале Gazeta.ru, пациенты старше 70 лет показывают на 28% меньшую трансдукцию нейронов по сравнению с младшей группой из-за сниженной экспрессии AAV-рецепторов. Пациенты с APOE4-аллелем демонстрируют повышенную иммуногенность и 15% худший отклик. «Необходимы наночастицы с липосомальными покрытиями, фокусный ультразвук для открытия BBB и предлечебная иммуносупрессия, но это повышает риски нейротоксичности, инфекций и геморрагий», – отметил специалист по CRISPR-терапии Института AIRI доктор Сергей Кузнецов в материале для SberPress . Дополнительные вызовы включают масштабирование производства GMP-качества AAV99-векторов и мониторинг офф-таргетов через WGS10 в долгосрочных когортах.
В отличие от симптоматических ингибиторов холинэстеразы или моноклональных антител вроде леканемаба, блокирующих периферический амилоид, SPLICER обеспечивает причинное генетическое лечение на уровне ДНК, потенциально останавливая болезнь на ранних стадиях. Это фундаментальное преимущество создает ограничение: критическая зависимость от системной доставки через BBB и контроля офф-таргетов в неделящемся нейрональном геноме. Дальнейшие исследования, как сообщил журнал Cell Reports Medicine 2 декабря 2025 года, сосредоточатся на prime editing-вариантах11 SPLICER, ИИ-оптимизированных гидах для нулевых офф-таргетов, комбинации с анти-Tau антителами и долгосрочных исследованиях на приматах для персистенции эффекта более 3 лет и подготовки к фазе III в 2027 году. Параллельно ведутся доклинические тесты на моделях Паркинсона и Хантингтона, где экзон-скиппинг показал аналогичную эффективность.